Метод Грама: различия между версиями
| [отпатрулированная версия] | [отпатрулированная версия] |
Содержимое удалено Содержимое добавлено
Нет описания правки |
викификация, орфография |
||
Строка 3:
'''Метод Грама''' — метод [[Окраска микроорганизмов|окраски микроорганизмов]] для исследования, позволяющий дифференцировать [[бактерии]] по биохимическим свойствам их [[Клеточная стенка|клеточной стенки]]. Предложен в [[1884 год]]у [[Дания|датским]] врачом [[Грам, Ганс Кристиан|Г. К. Грамом]].
По Граму бактерии окрашивают [[анилиновые красители|анилиновыми красителями]] — [[Генциановый фиолетовый|генциановым]] или [[Метиловый фиолетовый|метиловым фиолетовым]] и др., затем краситель фиксируют раствором [[
После промывания растворителем при окрашивании по Граму добавляется контрастный красный краситель, который окрашивает всех грамотрицательных бактерий в красный или розовый цвет. Это происходит из-за наличия внешней мембраны, препятствующей проникновению красителя внутрь клетки. Тест классифицирует бактерии, разделяя их на две группы относительно строения их клеточной стенки
Строка 17:
Окраска по Граму относится к сложному способу окраски, когда на мазок воздействуют двумя красителями, из которых один является основны́м, а другой — дополнительным. Кроме красящих веществ при сложных способах окраски применяют обесцвечивающие вещества: спирт, кислоты и др.
Для окраски по Граму чаще используют [[анилиновые красители]] трифенилметановой группы: генциановый, [[метиловый фиолетовый]] или [[кристаллвиолет]]. Грамположительные Грам (+) микроорганизмы дают прочное соединение с указанными красителями и
Грамотрицательные Грам (−) микроорганизмы образуют с основными красителями и
=== Подготовка материала для окраски ===
Строка 41:
=== Процесс окрашивания мазков ===
# На фиксированный мазок наливают один из осно́вных красителей на 2—3 минуты. Во избежание осадков окрашивают через фильтровальную бумагу.
# Сливают краску, аккуратно удаляют фильтровальную бумагу. Мазок заливают [[Раствор Люголя|раствором Люголя]] или
# Раствор сливают, мазок прополаскивают 96° этиловым спиртом или [[ацетон]]ом, наливая и сливая его, пока мазок не обесцветится и стекающая жидкость не станет чистой (приблизительно 20—40—60 секунд).
# Тщательно промывают стекла в проточной или дистиллированной воде 1—2 мин.
Строка 53:
# Окрашивают 5 мин в 1 % кристаллического фиолетового в дистиллированной воде.
# Быстро ополаскивают в 1 % растворе хлорида натрия.
# Обрабатывают 30 с в смеси: 1 часть
# Промокают фильтровальной бумагой.
# Дифференцируют, нанося на срез смесь равных объемов анилина и ксилола (1 — 2 мл); растворы сливают до тех пор, пока облачка красителя не перестанут отходить от среза.
| |||