Бромфеноловый синий

Бромфеноловый синий (3',3",5',5"-тетрабромофенолсульфонфталеин, БФС, альбутест[3]) натуральный краситель, также применяемый в лабораторной практике как pH-индикатор и маркёр при проведении электрофореза.

Бромфеноловый синий
Blu di bromofenolo struttura.PNG
Общие
Хим. формула C19H10Br4O5S
Классификация
Рег. номер CAS 115-39-9
PubChem
Рег. номер EINECS 204-086-2
SMILES
InChI
ChEBI 59424
ChemSpider
Приведены данные для стандартных условий (25 °C, 100 кПа), если не указано иное.
Commons-logo.svg Медиафайлы на Викискладе

ИндикаторПравить

Может применяться в диапазоне pH от 3.0 до 4.6. При pH ниже 3.0 раствор имеет жёлтый цвет, выше 4.6 -- пурпурный.[1]

МаркёрПравить

БФС удобно использовать в качестве свидетеля, т.е. для визуализации образцов. При нейтральных и слабощелочных значениях pH молекулы БФС заряжены отрицательно (pK~3.6), а сам раствор БФС яркого фиолетового цвета. Соответственно, при проведении электрофореза БФС перемещается от катода (-) к аноду (+), то есть в том же направлении, что и нуклеиновые кислоты (ДНК или РНК). То же самое происходит при электрофорезе белка, если используется метод Лэммли (Laemmli). При проведении электрофореза ДНК (РНК) подвижность БФС зависит от того, какой какой концентрации используют гель. Например, в 1% агарозном геле БФС мигрирует примерно также, как и фрагмент ДНК размером 300 н.п., а в 2% агарозе - как 150 н.п. фрагмент.

Маточный раствор БФС для проведения электрофореза ДНК в агарозном геле (6x*) можно приготовить по следующей прописи: сахароза - 4 г. (или глицерин 2,5 мл) БФС - 25 мг. TRIS-acetate-EDTA (50x) - 200 мкл. вода до 10 мл.

  • Соответственно, на каждые 5 мкл образца берут 1 мкл маточного раствора БФС (1:5).

См. такжеПравить

ПримечанияПравить