Малые интерферирующие РНК: различия между версиями

[отпатрулированная версия][отпатрулированная версия]
Содержимое удалено Содержимое добавлено
Строка 15:
Каждая цепочка нуклеотидов имеет фосфатную группу на 5'-конце и 3'-[[гидроксил]]ьную группу. Такая структура siRNA образуется в результате активности фермента [[Dicer]], субстратом которого являются длинные двуцепочечные РНК или [[короткие РНК, содержащие шпильки]].<ref>{{cite journal |author=Bernstein E, Caudy A, Hammond S, Hannon G |title=Role for a bidentate ribonuclease in the initiation step of RNA interference |journal=Nature |volume=409 |issue=6818 |pages=363–6 |year=2001 |pmid=11201747 |doi=10.1038/35053110}}</ref> Малые интерферирующие РНК могут быть искусственно введены в клетки для [[нокдаун гена|нокдауна]] определенного гена. Экспрессия практически любого гена с известной последовательностью нуклеотидов может быть изменена при введении специфических siRNA. Данное свойство делает siRNA удобным инструментом для исследования функций генов и изучения мишеней лекарственных средств.
 
== Индукция РНК-интерференции при помощи малых интерферирующих РНК и предшественников ==
[[Файл:2ffl-by-domain.png|thumb|Dicer protein colored by [[protein domain]].]]
[[Трансфекция]] экзогенной миРНКинтерферирующей может бытьРНК связана с определенными трудностями поскольку [[нокдаун гена]] имеет временный характер, особенно в быстро делящихся клетках. Один из способов преодоления этих трудностей состоит в том, чтобы изменить миРНК так, чтобы позволить ей [[экспрессия генов|экспрессироваться]] некоторымсоздать [[вектор (биология)|вектором]], например, [[плазмидаэкспрессия генов|плазмидойэкспрессирующий]]. Этоэту достигаетсямалую путеминтерферирующую введенияРНК. зациеливанияМежду междудвумя цепочками. Вдобавляют петлевой участок, в результате этогочего получаетсяобразуется одинодноцепочечный [[транскрипция (биология)|транскрипт]], соторый затемкоторые может быть переработандалее процессирован в функционирующуюрабочую миРНКмалую интерферирующую РНК. ТакиеПодобные транскипционные кассеты обычно используют промоутерпромотор U6 или H1 [[РНК полимераза#РНК-полимераза в эукариотических клетках|РНК полимеразы III]] (например, U6транскрибирующей илималые H1), который управляет транскрипцией малых ядерныхядерные РНК. (мяРНК) (U6 участвует в [[сплайсинг|сплайсинге генов]];, H1 — это компонент человеческой рибонуклеазы ([[рибонуклеаза#классификация|РНКазы P]]). Предполагается (хотя это не установлено достоверно), что полученный таким образом транскрипт миРНК затем обрабатывается ферментом [[Dicer]].
 
== Активация РНК ==