В биохимии фенилметилсульфонилфторид (англ. PMSF, сокращение от англ. phenylmethane sulfonyl fluoride или phenylmethylsulfonyl fluoride) — ингибитор сериновых протеаз, широко используемый при выделении белковых экстрактов из различных клеток. PMSF не ингибирует всех сериновых протеаз[источник не указан 561 день]. Он быстро разрушается в воде, поэтому в исходных ("стоковых") растворах в качестве растворителя, как правило, используется безводный этанол, изопропанол, кукурузное масло или ДМСО. Ингибирование протеолитических ферментов происходит при концентрации PMSF в диапазоне от 0,1 до 1 миллимоль. Период полужизни в водных растворах (при 25 °С) составляет 110 минут при pH 7, 55 минут при рН 7,5 и 35 минут при рН 8.[2]
| Фенилметансульфонил флюорид (PMSF) | |||
|---|---|---|---|
| |||
| Общие | |||
| Хим. формула | C7H7FO2S | ||
| Термические свойства | |||
| Температура | |||
| • плавления | 93 °C[1] | ||
| Классификация | |||
| Рег. номер CAS | 329-98-6 | ||
| PubChem | 4784 | ||
| Рег. номер EINECS | 206-350-2 | ||
| SMILES | |||
| InChI | |||
| RTECS | XT8040000 | ||
| ChEBI | 8102 | ||
| ChemSpider | 4620 | ||
| Приведены данные для стандартных условий (25 °C, 100 кПа), если не указано иное. | |||
 Медиафайлы на Викискладе | |||
PMSF специфично связывается сериновыми остатками активного центра в сериновых протеазах, однако, не связывает каких-либо других остатков серина в ферменте. Это является следствием гиперактивности этого серинового остатка, вызванного специфическими условиями окружающей среды в активном центре фермента. Поскольку PMSF, ковалентно связывается с ферментом, комплекс может быть визуализирован с помощью рентгеновской кристаллографии; следовательно, PMSF может использоваться в качестве химической метки для идентификации серина в активном центре в фермента.
- Фермент_(активный)-Ser-O-H + F-SO2СН2С6H5 → Фермент-Ser-O-SO2СН2С6H5 + HF
- Сериновая протеаза + PMSF → необратимый комплекс Фермента-PMS + HF
ЛД50 составляет менее 500 мг/кг[3]. PMSF является цитотоксическим химикатом, работа с которым должна проводиться только в вытяжном шкафу.
Примечания
править- ↑ Bradley J., Williams A., Andrew S.I.D. Lang Jean-Claude Bradley Open Melting Point Dataset // (unknown type) — 2014. — doi:10.6084/M9.FIGSHARE.1031637.V2
- ↑ GT James. Inactivation of the protease inhibitor phenylmethylsulfonyl fluoride in buffers (англ.) // Analytical Biochemistry[англ.] : journal. — 1978. — Vol. 86, no. 2. — P. 574—579. — doi:10.1016/0003-2697(78)90784-4. — PMID 26289.
- ↑ Roche Applied Science. The Complete Guide for Protease Inhibition. https://iti.stanford.edu/content/dam/sm/iti/documents/himc/immunoassays/ProteaseInhibitionGuide.pdf Архивная копия от 17 мая 2017 на Wayback Machine