Трис-ацетатный буфер
Трис-ацетатный буфер (TAE) — буферный раствор, содержащий трис, уксусную кислоту и ЭДТА (этилендиаминтетрауксусную кислоту).
Используется в молекулярной биологии в основном для гель-электрофореза при разделении фрагментов нуклеиновых кислот.[1] Имеет меньшую буферную ёмкость, чем TBE, в связи с чем быстрее истощается, однако линейные двухцепочечные фрагменты ДНК перемещаются в TAE быстрее.
| Компонент | Количество для приготовления 100 мл раствора |
|---|---|
| Трис (основание) | 24,22 г |
| ЭДТА (динатриевая соль) | 1,862 г |
| Уксусная кислота (ледяная) | 8,96 мл |
| H2O (деионизированная) | 73,3 г |
Для получения рабочей концентрации 50-кратный буфер разводят в дистиллированной воде в соотношении 1:49.
Применение править
TAE широко используется при проведении гель-электрофореза (в качестве форезного буфера и компонента агарозного геля) для очистки ДНК, анализа ДНК-продуктов, полученных в результате ПЦР, разделения фрагментов ДНК.[3]
См. также править
Примечания править
- ↑ Ogden, R.C., and Adams, D.A., (1987) Electrophoresis in agarose and acrylamide gels. Methods Enzymol., 152:, 61-87.
- ↑ Расчёт TAE буфера на molbiol.ru. Дата обращения: 5 октября 2012. Архивировано 16 октября 2012 года.
- ↑ Sambrook, Fritsch, and Maniatis (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, volume 3, apendices B.11 and B.23 ISBN 0-87969-309-6